植物丙酮酸磷酸雙激酶(PPDK)ELISA試劑盒

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ELISA試劑盒在國內有許多種叫法，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。

ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到科研工作者的認可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內生化領域的長足發(fā)展。

Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。

可檢測種屬

（人，小鼠，大鼠，植物，魚，蝦，蟹，牛，羊，狗，貓，微生物，細胞，土壤等動植物）

可以檢測樣為

（血清，血漿，唾液，尿液，組織，細胞上清，裂解液等）

產品檢測目的：

樣本水平表達（定量檢測，定性檢測，酶活性檢測）

規(guī)格：96T 可以檢測89個樣  48T可以檢測41個樣

備注：6個標準一個空白對照

有效期：6個月 保存2-8°C

elisa試劑盒的優(yōu)點：

一、高效、靈敏、特異的抗體；

二、穩(wěn)定的重復性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；

五、最大限度的節(jié)省實驗經費。

植物丙酮酸磷酸雙激酶(PPDK)ELISA試劑盒

常用方法及原理如下：

1. 夾心法：

夾心法常用于檢測大分子抗原，一般的操作步驟為:

a. 將具有專一性的抗體固著（coating）于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體

b. 加入待測檢體，檢體中若含有待測的抗原，則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結

c. 洗去多余待測檢體，加入另一種對抗原專一的一次抗體，與待測抗原進行鍵結

d. 洗去多余未鍵結一次抗體，加入帶有酶的二次抗體，與一次抗體鍵結

e. 洗去多余未鍵結二次抗體，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結果

原理：針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物。

2. 間接法

間接法常用于檢測抗體，一般的操作步驟為：

a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待測檢體，檢體中若含有待測的一次抗體，則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。

c. 洗去多余待測檢體，加入帶有酶的二次抗體，與待測的一次抗體鍵結。

d. 洗去多余未鍵結二次抗體，加入酶底物使酶呈色，藉儀器（ELISA reader）測定塑膠盤中的吸光值（OD值），以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量。

原理：利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體。

3. 競爭法

競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制，一般用于檢測小分子抗原，其操作步驟為：

a. 將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體

b. 加入待測檢體，使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結

c. 加入帶有酶的抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結，由于塑膠孔盤上固著的抗體數量有限，因此當檢體中抗原的量越多，則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗體就越少，亦即，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結，即所謂競爭法之由來。

d. 洗去檢體與帶有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，當檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤內留下之帶有酶的抗原越少，顯色也就越淺。

e. 當需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時，一般會考慮使用競爭法ELISA。

原理：將特異性抗體包被于固相載體表面，經洗滌后分成兩組：一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液，另一組只加酶標記抗原，經孵育洗滌后加底物顯色，這兩組底物降解量之差，即為所要測定的未知抗原的量。

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